Каков Спектрофотометр?
Спектрофотометр - один из приборов для исследований, обычно найденных во многих, исследуют и индустриальные лаборатории. Спектрофотометры используются для исследования в физике, молекулярной биологии, химии, и лабораториях биохимии. Как правило, название отсылает к Ультрафиолетово-видимому (УЛЬТРАФИОЛЕТОВЫЙ ВИС) Спектроскопию.
энергия света зависит от ее длины волны, обычно определяемой как <они> лямбда . Хотя электромагнитный спектр растягивается по огромному диапазону длин волны, большинство лабораторий может только измерить небольшую часть их. Спектроскопия УЛЬТРАФИОЛЕТОВОГО ВИСА имеет размеры между 200 и 400 миллимикронами (нм) для измерений Ультрафиолетового света, и приблизительно до 750 нм в видимой части спектра.
Для Спектроскопии УЛЬТРАФИОЛЕТОВОГО ВИСА, образцы обычно содержатся и измеряются в малых емкостях, назвал декоративные чашки . Они могут быть пластмассовыми если использующийся в видимой части спектра, но должны быть кварцем или плавленым кварцем если использующийся для УЛЬТРАФИОЛЕТОВЫХ измерений. Есть некоторые механизмы, которые могут использовать стеклянные пробирки.
Видимая Спектроскопия часто используется в промышленном отношении для колориметрии. Используя этот метод, образцы измерены в многократных длинах волны от 400-700 нм, и их профили меры поглощения света по сравнению со стандартом. Эта методика часто используется изготовителями тканей и чернил. Другие коммерческие пользователи Спектроскопии УЛЬТРАФИОЛЕТОВОГО ВИСА включают судебные лаборатории и принтеры.
В биологическом и химическом исследовании растворы часто определяются количественно, измеряя их степень поглощения света в специфической длине волны. Значение звонило <они>, коэффициент ослабления используется, чтобы вычислить концентрацию состава. Например, лаборатории молекулярной биологии используют спектрофотометры, чтобы измерить концентрации образцов РНК или ДНК. У них иногда есть продвинутый механизм, названный NanoDrop™ спектрофотометр , который использует фракцию количества образца по сравнению с используемым традиционными спектрофотометрами.
Для количественного анализа, чтобы быть действительным, образец должен повиноваться закону Ламберта-Бера. Это требует, чтобы мера поглощения света была непосредственно пропорциональна длине пути декоративной чашки и поглощению состава. Есть таблицы коэффициентов ослабления, доступных для многих, но не всех, составов.
Много цветов изменения химических и ферментативных реакций в течение долгого времени, и спектрофотометров очень полезны для измерения этих изменений. Например, ферменты оксидазы многофенола, которые вызывают плод к коричневому, окисляют растворы производных фенола, изменяя чистые растворы, которые явно покрашены. Такие реакции могут быть испытаны, измеряя увеличение меры поглощения света, поскольку цвет изменяется. Идеально, уровень изменения будет линеен, и можно вычислить показатели от этих данных. У более продвинутого спектрофотометра будет терморегулирующий штатив декоративной чашки, чтобы выполнить реакции в точном температурном идеале для фермента.
Лаборатории микробиологической и молекулярной биологии часто используют спектрофотометр, чтобы измерить рост культур бактерий. Эксперименты имитации ДНК часто делаются в бактериях, и исследователи должны измерить стадию роста культуры, чтобы знать, когда выполнить определенные процедуры. Они измеряют меру поглощения света, которая известна как оптическая плотность (ПЕРЕДОЗИРОВКА), на спектрофотометре. Можно сказать от ПЕРЕДОЗИРОВКИ, разделяются ли бактерии активно или начинают ли они умирать.
Спектрофотометры используют источник света, чтобы сиять множество длин волны через <них> монохроматор . Это устройство тогда передает узкий диапазон света, и спектрофотометр сравнивает интенсивность света, проходящую через образец к тому прохождению через справочный состав. Например, если бы состав растворен в этиловом спирте, ссылка была бы этиловым спиртом. Результат показан как степень меры поглощения света различия между ними. Это указывает на меру поглощения света типового состава.
Причина этой меры поглощения света состоит в том, что у и ультрафиолетового и видимого света есть достаточно энергии взволновать химикаты большие энергетические уровни. Это возбуждение приводит к более высокой длине волны, которая видима, когда мера поглощения света изображена против длины волны. Различные молекулы или неорганические составы абсорбируют энергию в различных длинах волны. Те с максимальным поглощением в видимой области замечены как покрашено человеческим ушком.
Растворы составов могут быть чистыми, но абсорбировать в УЛЬТРАФИОЛЕТОВОМ диапазоне. У таких составов обычно есть двойные связи или ароматические кольца. Иногда есть один или более обнаруживаемых пиков, когда степень поглощения изображена против длины волны. Если так, это может помочь в идентификации некоторых составов, сравнивая форму графика против того из известных справочных графиков.
Есть два типа механизмов спектрофотометра УЛЬТРАФИОЛЕТОВОГО ВИСА, единственного луча и двухлучевые. Они отличаются по тому, как они измеряют интенсивность света между ссылкой и образцом для испытаний. Двухлучевые механизмы измеряют ссылку и проверяют состав одновременно, в то время как мера по механизмам единственного луча прежде и после испытательного состава добавлена.